БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 9, с. 1530–1537
УДК 577.159
Выделение двух форм ДНК-полимеразы α из икры вьюна. Физико-химическая характеристика изоферментов
Аннотация
Описан метод выделения и очистки ДНК-полимеразы α из зрелой икры костистой рыбы вьюн Misgurnus fossilis. При хроматографии на оксиапатите ДНК-полимераза была разделена на две формы, имеющие различное сродство к сорбенту. Изучены физико-химические параметры очищенных изоферментов α1 и α2. С помощью гель-фильтрации и седиментации установлено, что обе формы α-полимеразы одинаковы по величине радиуса Стокса (63 Å) и коэффициенту седиментации (6,8S). Вычисленные значения молекулярной массы (M) и относительного коэффициента трения (f/f0) для обоих изоферментов составили соответственно 170000 дальтон и 1,72. Определенные с помощью изофокусирования в полиакриламидном геле изоэлектрические точки оказались равны 5,7 для α1-полимеразы и 5,8 — для α2-полимеразы. Таким образом, ДНК-полимераза α из икры вьюна представлена двумя видами кислых высокомолекулярных белков с выраженной пространственной асимметрией.