БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 9, с. 1522–1529
УДК 577.352.26
О способе ассоциации протеолипосом с плоской бислойной фосфолипидной мембраной
Аннотация
Протеолипосомы получали озвучиванием фрагментов мембран Halobacterium halobium, азолектина и холестерина в присутствии или в отсутствие нистатина. Включение нистатина во внутреннюю фазу протеолипосом было подтверждено в опытах с фенилдикарбаундекабораном (ФКБ−), так как поглощение ФКБ− на свету почти полностью снималось добавкой нистатина в среду. На протеолипосомах, не содержащих нистатин, этого эффекта не наблюдали. Протеолипосомы встраивали в присутствии ионов Ca2+ в бислойную фосфолипидную мембрану. Регистрировали фототок, генерируемый бактериородопсином: при этом объем, содержащий протеолипосомы (цис-объем), заряжался отрицательно, а объем, расположенный по другую сторону мембраны (транс-объем) — положительно. Отмечено возрастание фототока при добавлении нистатина в транс-объем, если нистатин имелся в протеолипосомах, и отсутствие эффекта, если протеолипосомы его не содержали. Поскольку нистатин эффективен только при добавлении с обеих сторон бислойной мембраны, наблюдаемое в наших опытах встраивание протеолипосом в плоскую мембрану, очевидно происходит таким образом, что их внутренний объем не смешивается с цис-объемом и они отделены от транс-объема бимолекулярной мембраной; при этом образуются нистатиновые каналы в той части плоской мембраны, которая отделяет внутренний объем протеолипосомы от транс-объема. Через эти поры ионы H+ (поток которых из цис-объема внутрь липосом осуществляет бактериородопсин) или какие-либо другие внутрилипосомальные ионы могут уравновешиваться с ионами транс-объема; результатом является нарастание фототока, создаваемого бактериородопсином.