БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 9, с. 1483–1490
УДК 577.152.344.1
Внеклеточная сериновая протеиназа A Streptomyces rutgersensis
Аннотация
Методом аффинной хроматографии на бацитрацин-сефарозе в присутствии Na2-ЭДТА выделена внеклеточная сериновая протеиназа Streptomyces rutgersensis — протеиназа A. Протеолитическая активность фермента полностью подавляется специфическими ингибиторами сериновых протеиназ — фенилметилсульфонилфторидом и диизопропилфторфосфатом, но не чувствительна к Na2-ЭДТА и n-оксимеркурбензоату натрия. Активность по гемоглобину максимальна при pH 9—10. Фермент наиболее устойчив в области pH 6—10. Молекулярная масса, определенная электрофорезом в градиенте концентрации полиакриламидного геля в присутствии DS-Na, равна 20000±2000. Протеиназа A S. rutgersensis близка к протеиназам A и B S. griseus по ряду свойств: 1) по аминокислотному составу: Asp17Thr22Ser23Glu7Pro6Gly30Ala13Cys4Val18Met1Ile5Leu9Tyr10Phe6Trp1His2Arg7, для которого характерно отсутствие лизина, 2) по N-концевой последовательности аминокислот: Leu-Ser-Gly-Gly-Asp-Ala-Ile-Tyr-Ser-Asn-Ser-Ser-Xaa-Xaa-Ser-Leu-, 3) по специфичности действия на B-цепь инсулина и 4) по способности проявлять протеолитическую активность в 8 М мочевине и 6 М хлориде гуанидиния. Протеиназа A S. rutgersensis лизирует клетки дрожжей Candida utilis. Кроме описанного фермента S. rutgersensis секретирует не менее двух других протеиназ.