БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 8, с. 1365–1373
УДК 577.152.344.1
Субтилизиноподобная протеиназа SSPB из Streptomyces spheroides шт. 35
Аннотация
Из культуральной жидкости Streptomyces spheroides шт. 35 выделена сериновая протеиназа, обладающая фибринолитическим действием. Последовательное применение аффинной хроматографии на бациллихин-силохроме, бацитрацин-сефарозе и ионообменной хроматографии на анионите ФАФ и катионите КМТ привело к 1060-кратной очистке и получению гомогенного фермента с выходом 19%. Его молекулярный вес равен 28000, аминокислотный состав: Asp31, Thr29, Ser28, Clu9, Pro14, Gly35, Ala42, Val26, Ile14, Leu13, Met2, Tyr9, Phe4, Trp3, His6, Lys4, Arg10. Фермент имеет изоэлектрическую точку при рН>10, оптимум протеолитического действия по расщеплению специфического субстрата субтилизинов Z-L-Ala-L-Ala-L-Leu-pNA при pH 10—11. Фермент стабилен в области pH 4—11, а также в 6 М солянокислом гуанидине при pH 8,0 в присутствии Ca2+. Протеиназа ингибируется диизопропилфторфосфатом, бензилсульфонилфторидом — специфическими ингибиторами сериновых протеиназ и белковым ингибитором из картофеля. Выделенная из культуры Streptomyces spheroides шт. 35 протеиназа SSPB относится к сериновым протеиназам субтилизинового типа и особенно близка сериновым протеиназам SGPD и SGPE из Streptomyces griseus.