БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 6, с. 1042–1051
УДК 577.122
Белоксинтезирующие структуры и синтез белка в лимфоцитах мыши
Аннотация
В работе изучали характеристики цитоплазматических мРНП-частиц лимфоцитов селезенки (коэффициенты седиментации и плавучую плотность), а также кинетику включения импульсной аминокислотной метки в эти частицы при секундных интервалах мечения (5, 15, 30, 60 с). При 5- и 15-секундном периодах мечения аминокислотная метка обнаруживается в полирибосомах (коэффициенты седиментации 130—240S и средняя плавучая плотность 1,55 г/см3) и в частицах небольших размеров (коэффициенты седиментации 80S и менее плавучая плотность 1,34, 1,50, и 1,60 г/см3). Через 30 с мечения происходит включение метки в частицы с промежуточными размерами (80—120S) и средней плавучей плотностью 1,47 г/см3, при этом включение в частицы небольших размеров не увеличивается. Через 60 с увеличивается содержание метки во всех 3 зонах сахарозного градиента. Обнаруженная последовательность появления аминокислотной метки сначала в частицах меньшего размера, а затем в частицах большего размера и другой плотности, а также данные по преследованию импульсной уридиновой метки позволяют предположить, что в лимфоцитах трансляция начинается уже в комплексах информосом с единичными рибосомами и продолжается по мере превращения этих комплексов в полирибосомы. Метод кратковременного мечения клеток импульсной аминокислотной меткой позволяет определить время трансляции полипептидной цепи по времени насыщения полисом меткой. Время трансляции H-цепи иммуноглобулина, определенное таким методом, составляет 30—45 с, а скорость синтеза полипептидной цепи ≈12 аминокислот за 1 с.