БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 6, с. 991–997
УДК 577.157
Аффинная хроматография и свойства cGMP-зависимой протеинкиназы из тканей креветки
Аннотация
Из тканей креветки Palaemon adspersus методом, включающим аффинную хроматографию на 8-(2-аминоэтил)-амино-cAMP-сефарозе, очищена cGMP-зависимая протеинкиназа, гомогенная по данным электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии DS-Na. Степень очистки — 11200, выход — 6,5%. Изоэлектрическая точка фермента равна 5,5. Методами гель-фильтрации и ультрацентрифугирования в градиенте плотности сахарозы установлено, что димер cGMP-зависимой протеинкиназы имеет молекулярную массу 157000 дальтон, коэффициент седиментации 7,2S и радиус Стокса 50 Å. Обнаружена также активная форма фермента с молекулярной массой 76500 дальтон (4,5S, 39 Å), представляющая, по-видимому, субъединицу cGMP-зависимой протеинкиназы. Активность обеих форм протеинкиназы стимулируется низкими концентрациями cGMP (Ka = 1·10-7 М). Молекулы мономера и димера можно представить удлиненными эллипсоидами с аксиальным отношением, близким к 7. Предполагается, что нативная cGMP-зависимая протеинкиназа состоит из двух субъединиц, каждая из которых содержит регуляторный и каталитический участки.