БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 5, с. 788–796
УДК 577.182
Получение нейротоксина и гемагглютинина Clostridium botulinum типа A и характеристика нейротоксина
Аннотация
Описан метод выделения электрофоретически и серологически гомогенного нейротоксина и высокоочищенного гемагглютинина из культуральной жидкости Cl. botulinum типа A штамм 501. Выход нейротоксина с удельной активностью (80—100)·106 DLM на 1 мг белка составляет 5—20%. Молекулярный вес полученного нейротоксина равен 150000, коэффициент седиментации — 7,1S, изоэлектрическая точка — при pH 6,2—6,3, максимум спектра флуоресценции соответствует 332 нм. Молекула токсина содержит 4 SH-группы. Показано, что нейротоксин состоит из 2 субъединиц с молекулярным несом 98000 и 56000. Хранение нейротоксина при -20° сопровождается его инактивацией и возникновением электрофоретической гетерогенности белка. В инактивированном токсине по сравнению с нативным белком обнаружено изменение заряда молекулы, смещение λмакс флуоресценции, потеря реакционной способности SH-групп при сохранении исходного молекулярного веса и серологических свойств. На основании полученных данных высказывается предположение о существенной роли конформационного состояния молекул токсина в проявлении биологической активности.