БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 5, с. 772–781
УДК 577.152.3
Функция остатка аргинина активного центра транскетолазы пекарских дрожжей
Аннотация
Изучено связывание анионных и неанионных субстратов-доноров с транскетолазой пекарских дрожжей, модифицированной 2,3-бутандионом по остатку аргинина. Модифицированный фермент связывает 2 молекулы тиаминпирофосфата на 1 моль белка, образует комплекс с переносом заряда, регистрируемый по спектрам кругового дихроизма (КД), и сохраняет способность связывать анионные и неанионные субстраты. При этом константы связывания, определенные по данным КД, не меняются или меняются незначительно. Значения Km для окислительной реакции, катализируемой транскетолазой в присутствии анионных и неанионных субстратов-доноров, не меняются при модификации транскетолазы, в то время как V уменьшается в 5—10 раз. Результаты исследования указывают, на то, что остаток аргинина не участвует в связывании субстратов с ферментом, но необходим для катализа.