БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 5, с. 732–738
УДК 577.152.3
Растворимые cAMP-зависимые протеинкиназы миометрия крольчих
Аннотация
В миометрии крольчих обнаружены две изоформы растворимой cAMP-зависимой протеинкиназы. Базальная активность их равна 2,1 и 10,87 нмоль 32P/мин на 1 мг соответственно, cAMP в концентрации 5 мкМ активировал обе изоформы в 1,5 раза. Кажущаяся Km для АТР равна 0,9·10-5 и 2,1·10-5 М для I и II изоформ соответственно. Km для гистона H1: I — 0,15 мг/мл и II — 0,29 мг/мл. Оптимум pH для обеих изоформ 7,3—7,6. Изоэлектрическая точка для изоформы I — 5,0, для II — 5,5. По данным электрофореза в DS-полиакриламидном геле молекулярный вес регуляторной субъединицы (R) изоформы I равен 47000, каталитической (C) — 31000. Разницы в электрофоретической подвижности C I и II изоформ не обнаружено. Мол. вес R II равен 54000. Обнаружена способность II изоформы к автофосфорилированию. На моль холофермента включалось до 1,5 моль 32P. В миометрии беременных крольчих обнаружена одна изоформа cAMP-зависимой протеинкиназы, которая по профилю элюции с ДЭАЭ-целлюлозы, по мол. весу регуляторной субъединицы, по изоэлектрической точке, а также по способности автофосфорилироваться соответствует второй изоформе фермента. Оптимальные условия для фермента из миометрия беременных крольчих следующие: pH от 7,0 до 9,0, концентрация сАМР — 10-8 М; базальная активность — 3,68 нмоль 32P/мин на 1 мг, cAMP активирует в 2,4 раза; кажущиеся Km для ATP и гистона H1 5,6·10-5 М и 0,42 мг/мл соответственно; в процессе автофосфорилирования на моль холофермента включалось 0,4 моль 32P.