БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 5, с. 718–724
УДК 577.152.2
Предстационарная кинетика гидролиза ATP CF1-ATPазой хлоропластов
Аннотация
Изучена кинетика обратимой инактивации CF1-ATPазы хлоропластов ионами Mg2+ и ADP. Скорость инактивации подчиняется уравнению 1-го порядка и не зависит от концентрации ADP. Анализ зависимости скорости инактивации от концентрации ионов Mg2+ показывает, что лимитирующей стадией инактивации является не связывание ионов Mg2+, а последующие стадии, включающие, вероятнее всего, конформационные перестройки фермента. Начальная Mg-зависимая активность CF1-ATPазы близка к активности, наблюдаемой в стационарном режиме в присутствии сульфита и метанола и примерно в 6 раз выше Ca-зависимой активности. Преинкубация CF1-ATPазы с ионами Mg2+ подавляет ее начальную активность. Эффект не снимается при введении в среду преинкубации ATP-регенерирующей системы (пируваткиназа и фосфоенолпируват), но ослабляется сульфитом и негидролизуемым аналогом ATP — β,γ-метиленаденозин-5-трифосфатом (АМРРСР). При добавлении АМРРСР в реакционную среду начальная скорость реакции снижена, а стационарная скорость возрастает. Сопоставление полученных данных с литературными позволяет заключить, что Mg-зависимая инактивация CF1-ATPазы вызывается прочносвязанным ADP. Последний может быть вытеснен ATP, который, в отличие от ADP, не образует с ферментом неактивный комплекс.