БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 4, с. 634–638
УДК 577.152.2
Функциональная роль сульфгидрильных групп тиаминпирофосфокиназы
Аннотация
Исследована функциональная роль сульфгидрильных групп тиаминпирофосфокиназы, выделенной из печени крысы. При использовании реагента Эллмана показано, что в реакцию окисления на димер нативного фермента вступают две сульфгидрильные группы. Модификация первой быстро реагирующей SH-группы приводит к полному, но частично обратимому торможению активности фермента. Mg2+, Mg-ATP2- в некоторой степени препятствуют инактивации. По-видимому, защита функциональных групп при помощи субстратов носит опосредованный через пространственную стабилизацию характер, поскольку число титруемых реагентом SH-групп до и после взаимодействия фермента с лигандами остается неизменным. Замена нитротиобензоата на цианид-ион при использовании фермента с небольшой степенью модификации приводит к регенерации лишь 3—7% активности. Предполагается, что блокирование высоко реакционной сульфгидрильной группы сопровождается глубокими изменениями в структуре белка. Эта группа не принимает прямого участия в катализе, а выполняет структурную функцию. Показано отсутствие дисульфидных связей в молекуле тиаминпирофосфокиназы.