БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 4, с. 550–558
УДК 577.153
Связывание субстратов с транскетолазой пекарских дрожжей. Функция анионной группы субстрата-донора
Аннотация
Методом кругового дихроизма изучено связывание транскетолазы пекарских дрожжей с фосфорилированными и нефосфорилированными субстратами-донорами. Определены константы диссоциации комплексов холотранскетолазы с ксилулозо-5-фосфатом (3,1·10-5 М), фруктозо-6-фосфатом (2,9·10-5 М), седогептулозо-7-фосфатом (2,7·10-5 М), диоксиацетоном (1,2·10-3 М) и фруктозой (1,5·10-3 М). Определены кинетические параметры Km и V для окислительной реакции, катализируемой транскетолазой в присутствии анионных и неанионных субстратов-доноров. Показано, что диоксиацетон может выполнять функцию субстрата в окислительной реакции, катализируемой транскетолазой. Установлено, что значения V для анионных (фруктозо-6-фосфат и оксипируват) и неанионных (фруктоза и диоксиацетон) субстратов близки по величине, в то время как значения Km для них различаются на несколько порядков. Результаты исследования показывают, что анионная группа субстрата-донора существенна для связывания с холоферментом, но не влияет на скорость окислительной реакции, катализируемой транскетолазой.