БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 3, с. 379–386
УДК 577.150 + 541.183 + 577.15.02
Изучение методом спиновых меток состояния активного центра и микроокружения α-химотрипсина, солюбилизованного в октане с помощью поверхностно-активного вещества — аэрозоля OT
Аннотация
α-Химотрипсин солюбилизуется в октане путем включения молекул фермента в обращенные мицеллы аэрозоля OT. Для изучения состояния фермента в этой системе были использованы спиновые метки двух типов: ковалентно связанная в районе активного центра фермента и свободно солюбилизованная мицеллами. Полученные данные указывают на то, что полярность микросреды, в которой находится фермент, зависит от степени гидратации ПАВ* ([H2O]/[ПАВ]). По мере увеличения степени гидратации ПАВ полярность микросреды монотонно увеличивается, приближаясь к величине, характеризующей полярность микросреды, существующей в водном растворе фермента. Молекулярная подвижность активного центра α-химотрипсина (частота вращения ковалентно связанной спиновой метки) обнаруживает ярко выраженный минимум при значении [H2O] / [ПАВ] ~15—20, а по мере дальнейшего увеличения степени гидратации ПАВ происходит «размягчение» активного центра фермента до состояния, характерного для водного раствора. В то же время частота вращения спинового зонда, введенного в систему, монотонно падает по мере увеличения степени гидратации ПАВ, что свидетельствует об определенном увеличении жесткости внутренней структуры обращенных мицелл в октане.
Текст статьи
Сноски
* Принятые сокращения. ПАВ — поверхностно-активные вещества, АОТ — аэрозоль ОТ.