БИОХИМИЯ, 1983, том 48, вып. 2, с. 292–296

УДК 547.963.32

Исследование устойчивости и применения для гибридизации иммобилизованных высокополимерных РНК

© 1983 Ю.П. Зеров, А.В. Аверьянов, К.А. Козлов, Л.С. Чеснокова

Аннотация

Изучена эффективность иммобилизации высокополимерных РНК дрожжей на аминированном силикатном носителе типа хромосорб. Разработанный метод позволяет пришивать к носителю в недеградированном состоянии более 90% добавленной РНК (≈2,0 мг РНК на 1 г носителя). В условиях гибридизации нуклеиновых кислот (65°, 2×ССР*) в присутствии следовых количеств проназы отщепление РНК от носителя наблюдается только в течение первых 6 ч инкубации. Затем до 48 ч инкубации с носителем остается прочно связанной половина или более иммобилизованной поли(A)-мРНК. Иммобилизованные мРНК и рРНК дрожжей гибридизовались с тотальной дрожжевой [125I]ДНК. Один цикл гибридизации позволяет очистить 26S-pДHK не менее чем в 10 раз. Гибридизация ДНК с иммобилизованными РНК может использоваться для очистки генетического материала.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* ССР — стандартный солевой раствор, 0,15 М NaCl+0,015 М цитрат натрия.