Свойства системы АТР-зависимого транспорта Са²+ во фракции плазматических мембран клеток миометрия

Аннотация

В опытах, проведенных на фракции плазматических мембран (ПМ) миометрия крупного рогатого скота, характеризующейся активностью Ca²⁺-ATPазы, установлено, что в отсутствие Mg²⁺ добавление 3 мМ ATP не приводит к увеличению уровня поглощения ⁴⁵Ca²⁺ как в присутствии, так и в отсутствие 20 мМ фосфата. Это свидетельствует о том, что активность Mg²⁺-независимой Ca²⁺-активируемой ATPазы ПМ клеток миометрия не может являться биохимическим выражением механизма трансмембранного переноса кальция. При изучении ATP-зависимого накопления ⁴⁵Ca²⁺ и Mg²⁺,Ca²⁺-ATPазной активности показано, что оптимальными концентрациями Ca²⁺ являются 5·10^-5—5·10^-4 М. Величины ATP-зависимого накопления ⁴⁵Ca²⁺ и Mg²⁺,Ca²⁺-ATPазной активности максимальны при 3—5 мМ концентрации Mg²⁺ и 1—3 мМ концентрации ATP. Оптимальными являются значения pH 6,4—7,0 (50 мМ трис-малеат-HaOH-буфер). Рассчитаны величины K_m и V для процесса накопления ⁴⁵Ca²⁺ и Mg²⁺,Ca²⁺-ATPазной активности. Показано, что Sr²⁺ и Ba²⁺ могут заменять Ca²⁺ при активации базальной Mg²⁺-АТРазы, а Co²⁺ и Mn²⁺ обладают способностью заменять Mg²⁺ в случае процесса ATP-зависимого накопления кальция везикулами ПМ клеток миометрия. Обнаружена высокая субстратная специфичность системы транспорта кальция по отношению к ATP. Mg²⁺, Ca²⁺-ATPазная активность и ATP-зависимое накопление ⁴⁵Ca²⁺ полностью ингибируются n-хлормеркурибензоатом при 10^-5 М концентрации. Не обнаружено влияния физиологически активных веществ — стимуляторов сокращения матки (окситоцина, брадикинниа, серотонина, простагландина F_2α, гистамина) — на процессы ATP-зависимого накопления ⁴⁵Ca²⁺, связывание катиона и величину активности Mg²⁺-ATPазы и Ca²⁺-ATPазы. На основании сравнения свойств Mg²⁺,Ca²⁺-ATPазы и Mg²⁺,ATP-зависимого транспорта Ca²⁺, а также свойств Ca²⁺-транспортирующих систем саркоплазматического ретикулума, эритроцитов и синаптосом сделан вывод, что Mg²⁺,Ca²⁺-ATPаза ПМ клеток миометрия участвует в трансмембранном переносе кальция во внеклеточное пространство против концентрационного градиента. Обсуждается относительный вклад системы Mg²⁺,ATP-зависимого транспорта Ca²⁺ и Na⁺-Ca²⁺-обмена в процессе релаксации мышечных клеток матки.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: