БИОХИМИЯ, 1982, том 47, вып. 12, с. 2035–2041
УДК 577.158
Очистка и некоторые свойства молекулярных форм 6-фосфоглюконатдегидрогеназы из печени крысы
Аннотация
Путем последовательного фракционирования белков при помощи (NH4)2SO4 и ионообменной хроматографии на КМ-целлюлозе, ДЭАЭ-целлюлозе и SP-сефадексе показано присутствие в печени крысы 2 изоформ 6-фосфоглюконатдегидрогеназы (A и B). Разработанный метод позволяет полностью разделить эти формы, а также выделить их в препаративных количествах с удельной активностью 5,7 и 10,7 ед./мг белка соответственно. Формы A и B в нативном состоянии имеют молекулярный вес 107000 и являются димерами, состоящими из субъединиц одинакового молекулярного веса (54000). Обе изоформы имеют оптимум pH 8,5. Отмечена их различная чувствительность к MgCI2 и MnCl2. Ионы тетраэдрической структуры (фосфат, молибдат, арсенат) выступают как ингибиторы обеих молекулярных форм 6-фосфоглюконатдегидрогеназы. Графики Аррениуса для скорости реакции непрерывны в интервале температур при 21—44°, энергия активации составляет 12750 и 13500 кал/моль, температурный коэффициент равен 2,05 и 2,15 для изоформ A и B соответственно.