БИОХИМИЯ, 1982, том 47, вып. 11, с. 1825–1830
УДК 577.156
Внеклеточная сериновая протеиназа Bacillus licheniformis
Аннотация
Внеклеточная сериновая протеиназа B. licheniformis очищена аффинной хроматографией на n-(ω-аминометил)фенилборной кислоте, ковалентно связанной с CH-сефарозой. Применение этого сорбента, специфичного к активному центру сериновых протеиназ, привело к 35-кратной очистке фермента с кажущимся выходом по активности 288-%, что объясняется отделением ингибирующих фермент примесей. Последовательность 35 аминокислотных остатков с аминного конца фермента B. licheniformis совпадает с N-концевой последовательностью субтилизина Карлсберг — протеиназы, образуемой, как предполагается, одним из штаммов B. subtilis. Поскольку аминокислотный состав и функциональные свойства этих ферментов также не обнаруживают сколько-нибудь существенных отличий, можно считать, что обе сериновые протеиназы крайне близки, а вероятнее, идентичны. Такой вывод ведет к пересмотру существующих представлений о необычно быстрой эволюции субтилизинов. Три множественные формы, обнаруженные у протеиназы В. licheniformis, отличаются лишь зарядами и образуются, по-видимому, вследствие частичного дезамидирования остатков аспарагина или глутамина.