БИОХИМИЯ, 1982, том 47, вып. 10, с. 1687–1694
УДК 577.17 : 576.807.7
Анализ инсулин-рецепторных взаимодействий в плазматической мембране печени крыс с использованием антител к инсулину
Аннотация
Преинкубация плазматических мембран гепатоцита крысы с антиинсулиновой сывороткой (АИС) вызывала 3-кратное повышение специфического связывания [125I] инсулина, добавленного к мембранам, отмытым от АИС. Степень увеличения связывания зависела как от времени преинкубации, так и от концентрации АИС; при возрастании обоих параметров эффект выходил на плато. Анализ Скэтчарда показал, что преинкубация с АИС приводит к увеличению аффинности связывающих мест как с низким, так и с высоким сродством, тогда как число мест связывания не возрастает. Использование для преинкубации нескольких видов иммунных и неиммунных сывороток позволило выявить видоспецифичность эффекта, на основании чего высказано предположение, что антитела инициируют на мембране иммунологическую реакцию. При изучении влияния АИС на диссоциацию связанных с мембранами меченых инсулинов, различающихся по сродству к данной АИС, показано, что антитела способны взаимодействовать со сформированным гормон-рецепторным комплексом, но не могут действовать на сам рецептор без инсулина. На основании полученных данных сделан вывод о наличии на интактной мембране гепатоцита инсулина, связанного с рецептором, который и является объектом действия АИС. Реакция антиген — антитело приводит к изменению функционального состояния как занятых рецепторов, так и свободных, связывающих [125I] инсулин. Последние вовлекаются в процесс вторично в результате дестабилизации межрецепторных взаимодействий, спровоцированных антителами к гормону.