БИОХИМИЯ, 1982, том 47, вып. 10, с. 1629–1634
УДК 577.154
Свойства пируваткарбоксилазы факультативного метилотрофа Pseudomonas oleovorans
Аннотация
Пируваткарбоксилаза факультативного метилотрофа Pseudomonas oleovorans очищена в 40 раз. Процедура очистки включала фракционирование сульфатом аммония, гель-фильтрацию через ультрагель AcA-34, ионообменную хроматографию на ДЭАЭ-биогеле A и концентрирование на ДЭАЭ-сефарозе CL-6B. Фермент проявляет максимальную активность в присутствии Mg2+ при pH 7,5 и температуре 40°; нестабилен, полностью инактивируется в течение 6 ч при 25°. В присутствии Mg2+ моновалентные катионы стимулируют фермент. Молекулярный вес пируваткарбоксилазы, определенный гель-фильтрацией через сефарозу CL-6B, равен 300000. В состав молекулы фермента входит биотин. Кажущиеся значения Km для пирувата — 1,77 мМ, для ATP — 0,19 мМ, для HCO3− — 0,23 мМ, CoASAc, α-кетоглутарат и глутамат не влияют на активность. Фермент ингибируется аспартатом, малатом, оксалоацетатом и активируется цитратом, изоцитратом и сахарофосфатами. Обсуждается роль пируваткарбоксилазы в метилотрофном метаболизме Ps. oleovorans.