БИОХИМИЯ, 1982, том 47, вып. 9, с. 1476–1482
УДК 577.158
Сравнительное исследование кинетики реакции восстановления цитохрома P-450 NADPH-цитохром-P-450—редуктазой и дитионитом
Аннотация
Методом остановленного потока изучена зависимость кинетических параметров реакций NADPH-зависимого восстановления цитохрома P-450 и восстановления цитохрома P-450 дитионитом от температуры. Показано, что кинетические кривые для обеих реакций описываются суммой двух экспонент. Графики зависимости логарифма константы скорости для быстрой фазы от обратного значения абсолютной температуры линейны для обеих реакций. Для констант скорости медленной фазы на соответствующих графиках имеются переломы при 22 и 33° в случае восстановления цитохрома P-450 дитионитом и при 31° в случае NADPH-зависимого восстановления цитохрома P-450. Полученные нами значения констант скорости и энергии активации (56±5 кДж/моль) для быстрой фазы NADPH-зависимого восстановления цитохрома P-450 совпали с известными из литературы величинами каталитических констант и энергий активации для реакций деметилирования третичных аминов. Это свидетельствует о том, что для этих реакций лимитирующей скорость стадией может быть перенос первого электрона от NADPH-цитохром-P-450 — редуктазы к цитохрому P-450. Несовпадение характера зависимости кинетических параметров от температуры для двух реакций восстановления цитохрома P-450 дитионитом и NADPH свидетельствует о различных причинах их двухфазного характера.