БИОХИМИЯ, 1982, том 47, вып. 8, с. 1332–1337
УДК 577.157.08 : 577.150.14
Титрование активных центров ферментов обратимыми ингибиторами. Дипептидил-карбоксипептидаза — ингибитор SQ 20881 из яда змей Bothrops jararaca
Аннотация
Рассмотрены основные принципы метода определения концентрации активных центров ферментов с помощью обратимого ингибирования. Показана необходимость учета влияния субстрата на равновесие в системах с быстро диссоциирующим фермент-ингибиторным комплексом. Разработаны методы определения концентрации активных центров дипептидил-карбоксипептидазы из коры почек быка с использованием конкурентного ингибитора SQ 20881 (>Glu-Trp-Pro-Arg-Pro-Glu-Ile-Pro-Pro). Рассчитаны кинетические и равновесные константы взаимодействия фермента с ингибитором: ki = 3,2·106 М-1 с-1; k-1 = 8 мс-1; Ki· = 2,5(±0,5) нМ.