БИОХИМИЯ, 1982, том 47, вып. 7, с. 1084–1090
УДК 577.153.35
Кооперативный механизм фосфорилирования мономерной и димерной форм неорганической пирофосфатазы из пекарских дрожжей
Аннотация
Проведено сравнительное изучение фосфорилирования нативной димерной и искусственно полученной мономерной форм неорганической пирофосфатазы и ее стабилизированного фторидом комплекса с PPi. Максимальное включение Pi для димерного белка составляло 0,5, а для мономерного — 1 моль на 1 моль субъединиц. Форма кривых насыщения указывала на наличие сильных положительных кооперативных взаимодействий. Величина коэффициента Хилла, составлявшая 5,5 для свободного димерного фермента, резко уменьшалась при блокировании активного центра и/или переходе к мономерному ферменту. Ускорение дефосфорилирования под действием Pi в присутствии Mg2+ наблюдалось только для димерного фермента. Полученные результаты показывают, что фосфорилирование нативной димерной пирофосфатазы происходит по механизму «типа качелей», причем связывание Pi в активном центре оказывает сильное влияние на отдельные стадии этой реакции.