БИОХИМИЯ, 1982, том 47, вып. 5, с. 778–783
УДК 577.156.3
Активация трипсина субстратом — метиловым эфиром N-ацетил-L-норвалина
Аннотация
Кинетика гидролиза трипсином неспецифического субстрата — метилового эфира N-ацетил-L-норвалина— изучена в широком диапазоне концентраций субстрата (от 0,02 мМ до 25,5 мМ). Обнаружено, что зависимость начальной скорости реакции от концентрации субстрата подчиняется уравнению Михаэлиса — Ментен только в области низких концентраций метилового эфира N-ацетил-L-норвалина (до 0,3 мМ). При более высоких концентрациях субстрата скорость реакции значительно превышает максимальную скорость, определенную на основании уравнения Михаэлиса — Ментен. Показано, что кинетика реакции в области высоких концентраций субстрата соответствует схеме активации фермента субстратом, предложенной Троубриджем с соавт. Показано, что продукт реакции N-ацетил-L-норвалин не активирует реакцию гидролиза метилового эфира N-ацетил-L-норвалина трипсином. Определены кинетические (kкат = 0,0184 с-1 и Km = 0,08 мМ) и активационные (k*кат = 2,97 с-1 и Km* = 56 мМ) параметры реакции гидролиза этого субстрата трипсином при pH 8,0 и 25°.