БИОХИМИЯ, 1982, том 47, вып. 2, с. 276–283
УДК 577.158
Аффинная хроматография менадионредуктазы на сефарозе с аминоароматическими и аминоалифатическими хинонными лигандами
Аннотация
Описаны новые модификации сефароз с лигандами: 4-гексаметиленимино-5-метокси-1,2-бензохиноном (I), 4-(n-иминометиланилино)-5-метокси- 1,2-бензохиноном (II), 4-(n-иминометиланилино)-5-метокси-1,2-диоксибензолом (III) и исследованы их сорбционные свойства по отношению к менадионредуктазе (КФ 1.6.99.2). Модификации с лигандом (II) аффинно сорбируют менадионредуктазу. Фермент удерживается в присутствии высоких концентрации электролитов в диапазоне pH 6,0—7,5. Элюция специфична и достигается NAD(P)H, но не NAD(P). После хроматографии фермент гомогенен при исследовании методом диск-электрофореза в полиакриламидном геле. В аналогичных условиях сефарозы с (I) и (III) слабо связывают фермент. Сделано предположение о том, что в механизме сорбции существенная роль принадлежит дисперсионным взаимодействиям и образованию молекулярного комплекса с переносом заряда между аминоароматическим хинонным лигандом и структурами активного центра менадионредуктазы.