БИОХИМИЯ, 1982, том 47, вып. 2, с. 266–271
УДК 577.154.52
Свойства каталитически активного фрагмента, полученного путем ограниченного протеолиза киназы фосфорилазы
Аннотация
Показано, что активация киназы фосфорилазы при ограниченном протеолизе субтилизином приводит к образованию новых форм фермента, отличающихся по молекулярному весу. По данным градиентного электрофореза в полиакриламидном геле, высокомолекулярная фракция состоит из активных фрагментов с разным молекулярным весом. В низкомолекулярной фракции обнаружен только одни активный фрагмент с молекулярным весом 80000. При диск-электрофорезе в полиакриламидном геле в присутствии DS-Na активные фрагменты высоко- и низкомолекулярной фракции не гомогенны. Изучены кинетические свойства низкомолекулярного фрагмента и показано, что нативная неактивированная киназа фосфорилазы и фрагмент при pH 8.2 имеют одинаковые величины Km для субстратов (фосфорилаза Б и Mg-ATP). В отличие от неактивированной киназы, фрагмент характеризуются снижением чувствительности к Ca2+, к эффекторам (гликоген и глюкозо-6-фосфат) и отсутствием выраженного оптимума в области pH от 6,0 до 9,0.