БИОХИМИЯ, 1982, том 47, вып. 2, с. 197–205
УДК 577.153.35
Извлечение и исследование солюбилизируемой тритоном ATPазы ресничек Tetrahymena pyriformis
Аннотация
Из ресничек Т. pyriformis воздействием неионного детергента тритона X-100 солюбилизированы белки, обнаруживающие Ca2+-стимулируемую ATPазную активность. Электронно-микроскопическими исследованиями показано, что в результате воздействия тритона на изолированные реснички происходит отделение мембран от ресничек. При помощи электрофоретического анализа белкового состава ресничек до и после воздействия детергента и полученного тритонового экстракта установлено, что высокомолекулярные белки аксонемы (динеин, нексин) и белок микротрубочек — тубулин не извлекаются тритоном X-100. В тритоновый экстракт солюбилизируются белки с молекулярными массами, соответствующими 104000, 94000, 71000, 62000 и 21000 дальтон. Методом хроматографии на ДЭАЭ-сефадексе A-50 достигнута значительная очистка (и 10—25 раз) солюбилизированной тритоном ATPазы. Электрофоретический анализ очищенной фракции Ca2+-ATPазы ресничек показал, что она состоит из двух субъединиц с молекулярными массами 93000 и 85000 дальтон. Обсуждается возможная роль солюбилизируемой тритоном ATPазы в осуществлении двигательной функции ресничек Т. pyriformis.