БИОХИМИЯ, 1982, том 47, вып. 1, с. 153–161
УДК 547.963.32
Репликативное метилирование ДНК в L-клетках: действие S-изобутиладенозина и циклогексимида и возможное существование двух ДНК-метилаз
Аннотация
В клетках мышиных фибробластов в культуре (L-клетки) метилирование ДНК происходит по крайней мере в два этапа — на первом из них метилируются фрагменты Оказаки (до уровня 100·m5C/C+m5C = 2,8—2,9), на втором — происходит метилирование образующихся при легировании фрагментов «линкерных» участков ДНК (до уровня 6,0). Фрагменты Оказаки после их синтеза более не метилируются, так что в них примерно половина сайтов метилирования (CG) остается немодифицированными. Ингибитор реакции трансметилирования S-изобутиладенозин ингибирует метилирование «линкерных» участков вновь синтезируемой ДНК и не влияет на метилирование фрагментов Оказаки. При подавлении синтеза белка (в том числе гистонов) циклогексимидом в процессе репликации экспонируются новые, дополнительные сайты метилирования, так что уровень метилирования вновь синтезируемой полимерной ДНК достигает 6,0, что соответствует модификации всех содержащихся в ней CG-динуклеотидов. Предлагается модель репликативного метилирования ДНК, главным моментом которой является существование двух различных по специфичности ДНК-метилаз. Предполагается, что одна из ДНК-метилаз обладает высокой специфичностью и функционирует в комплексе с ДНК-полимеразой, а другая характеризуется вырожденной специфичностью и функционирует в свободной (вне репликативного комплекса) форме.