БИОХИМИЯ, 1981, том 46, вып. 11, с. 1963–1969
УДК 577.154
Очистка и свойства транскетолазы из печени крыс
Отдел регуляции обмена веществ АН БССР, Гродно
Поступила в редакцию 03.10.1980
Аннотация
Транскетолаза выделена из сырой ткани печени крысы и очищена применением сульфата аммония, фракционированием на КМ-целлюлозе и адсорбционной хроматографией на гидроксилаппатите. Нативный препарат фермента, представляющий димер субъединиц одинакового молекулярного веса — 70000, электрофоретически гомогенен с удельной активностью 2,8 ед./мг при 30°. Энзиматическим и флуориметрическим методами определено наличие 2 моль тиаминдифосфата на 1 моль белка. Графики Аррениуса для скорости транскетолазной реакции (в качестве субстрата — смесь фосфопентоз) непрерывны при 10—32°, энергия активации составляет 89,9 кДж/моль, температурный коэффициент 3,3. Зависимость скорости реакции от концентрации субстратов носит гиперболический характер, кажущаяся константа Михаэлиса для ксилулозо-5-фосфата равна 2,2·10−5 М. Ионы тетраэдрической структуры (арсенат, фосфат, сульфат) выступают как конкурентные ингибиторы реакции, катализируемой транскстолазой из печени крыс.