Структурно-функциональные характеристики фотосинтетических реакционных центров, выделенных с лаурилдиметиламинооксидом из Rhodopseudomonas sphaeroides (дикий тип)

Аннотация

Описан способ выделения фотохимически активных реакционных центров (РЦ) из хроматофоров Rps. sphaeroides (дикий тип) с использованием лаурилдиметиламинооксида (ЛДАО) в качестве детергента. Полученный препарат свободен от загрязнения светособирающим пигмент-белковым комплексом и цитохромами. Показатели поглощения препарата, характеризующие высокую степень его чистоты, составляют A₂₈₀/A₈₀₀= 1,2—1,3; A₇₆₀/A₈₀₀/A₈₇₀= 1 : 2 : 0,9. Белковый компонент препарата представлен главным образом 3 полипептидами, электрофоретическая подвижность которых в полиакриламидном геле соответствует молекулярным массам субъединиц 30 000, 24 000 и 20 000. Под действием света в этом препарате наблюдается эффективный перенос электрона от димера бактериохлорофилла (Бхл)₂ в систему хинонных акцепторов (X₁X₂). Нормальный потенциал полувосстановлення (E_m) для (Бхл)₂ при pH 7,2 равен 475 мВ. Константа скорости прямого переноса фотомобилизованного электрона от X₁⁻ на X₂ составляет ~=0,5·10³ с⁻¹ при 300К (0,01 М фосфатный буфер с 0,05% ЛДАО, pH 7,2). Эффективность этого процесса экспоненциально уменьшается при понижении температуры в интервале от 300 до 230К, энергия активации E_a~=8 ккал. Константа скорости рекомбинации образующихся на свету ион-радикальных продуктов (Бхл)₂⁺ и X₁-составляет 5·10⁻² с⁻¹ при 180К. Полученный препарат может быть в дальнейшем использован для исследования как механизма первичных реакций фотосинтеза, так и электронно-конформационных взаимодействий в РЦ.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: