БИОХИМИЯ, 1981, том 46, вып. 9, с. 1674–1680
УДК 577.153.35
Стабильное соединение неорганической пирофосфатазы с пирофосфатом, полученное реакцией с фосфатом в присутствии фторида
Лаборатория молекулярной биологии и биоорганической химии им. А.Н. Белозерского МГУ, Москва
Поступила в редакцию 28.11.1980
Аннотация
Инкубация неорганической пирофосфатазы из пекарских дрожжей с фосфатом и MgCl2 в присутствии фторида приводит к постепенной инактивации фермента, которая сопровождается включением в белок PPi в количестве около 2 моль/моль. Константа скорости этого процесса увеличивается с ростом концентраций всех трех реагентов, и ее максимальная наблюдаемая величина составляет 0,11 мин−1. Связанный PPi не отделяется при гель-фильтрации. Скорость спонтанного разрушения соединения фермента с пирофосфатом и характер влияния на нее ЭДТА и Mg2+ такие же, как для аналогичного соединения, получаемого при ингибировании фторидом реакции гидролиза PPi. Результаты показывают, что в реакциях гидролиза и синтеза PPi пирофосфатазой фторид стабилизирует одно и то же промежуточное соединение фермента с пирофосфатом.