БИОХИМИЯ, 1981, том 46, вып. 9, с. 1622–1632
УДК 576.311
Сравнительная характеристика исходных и реконструированных путем самосборки мембран эндоплазматического ретикулума
Центральная научно-исследовательская лаборатория 2-го Московского государственного медицинского института им. Н.И. Пирогова
Институт биологической физики АН СССР, Пущино Московской области
Поступила в редакцию 12.09.1980
Аннотация
Разработан метод реконструкции биомембран из солюбилизированных холатом натрия микросомальных белков и липидов при удалении детергента диализом с последующей обработкой 10%-ным альбумином. Сравнительный анализ исходных и реконструированных мембран показал, что фосфолипидный, белковый и ферментный состав их сходен или незначительно отличается. Реконструированные мембраны содержали в 1,5 раза больше цитохрома b5 и равное количество цитохрома P-450; не более 20% цитохрома P-450 было представлено в неактивной форме. Восстановленный гемопротеид инактивировался с меньшей скоростью, чем в тенях. Сходный характер солюбилизации микросомальных переносчиков электронов при действии трипсина свидетельствовал об одинаковой топографии этих белков в тенях и реконструированных мембранах. Наиболее эффективно реконструировались N-деметилазы при использовании в качестве косубстратов NADH и гидроперекиси кумила, в то время как n-гидроксилазная и О-деалкилазная активности реактивированного цитохрома P-450 не сохранялись. Несмотря на эффективное удаление детергента при данном методе реконструкции, на сходную локализацию микросомальных переносчиков электронов в реконструированных мембранах и тенях и реконверсию цитохрома P-420 в цитохром P-450, полного восстановления свойств микросомальной мембраны и ее редокс-систем не происходило.