БИОХИМИЯ, 1981, том 46, вып. 9, с. 1576–1584
УДК 547.963.32
Выделение и свойства ДНК-полимеразы из экстремально-термофильной бактерии Thermus flavus
Институт общей генетики АН СССР, Москва
Поступила в редакцию 08.08.1980
Аннотация
Выделена ДНК-полимераза из экстремально-термофильной бактерии Thermos flavus. В результате пяти стадий очистки получен электрофоретически гомогенный препарат фермента с Mr 66000. Выделенный фермент термостабилен и имеет температурный оптимум активности на ДНК-матрицах, равный 70° и на РНК-матрицах— 50°. Фермент не содержит сопутствующих эндо- и экзонуклеазных активностей. Для проявления максимальной активности фермента необходимо наличие в инкубационной смеси матрицы, четырех дезоксирибонуклеозидтрифосфатов, одновалентных и двухвалентных катионов. Фермент проявляет высокую активность при использовании в качестве матриц «активированной» ДНК*, поли(dA)-поли(dT), поли(dA)-олиго(dT)10, поли(rA)-олиго(dT)10, умеренную активность на двунитчатой и однонитчатой ДНК и неактивен на поли(rC)-олиго-(dG)12-18 и природных молекулах РНК. Проведен сравнительный анализ данной ДНК-полимеразы с выделенным нами ранее подобным ферментом из экстремально-термофильной бактерии Thermus aquaticus YT-1 по основным физико-химическим свойствам.