БИОХИМИЯ, 1981, том 46, вып. 7, с. 1258–1266
УДК 547.963.32
Увеличение доли повторяющихся последовательностей ДНК в транскрипционно активных участках генома крысы при индукции кортизолом и фенобарбиталом
Институт цитологии и генетики СО АН СССР, Новосибирск
Новосибирский государственный университет
Поступила в редакцию 10.07.1980
Аннотация
Исследовано влияние индукторов транскрипции, таких как кортизол, фенобарбитал и 3-ацетат-16α(β)-изотиоциано-прегненолон (АИП) (как и фенобарбитал активирует систему многоцелевых оксидаз) на организацию нуклеотидных последовательностей во фракциях ДНК, соответствующих функционально различным районам генома. При разных концентрациях NaCl и разных pH водных растворов фенола, используемого для депротеинизации, из клеток печени крыс выделили три фракции ДНК. Экстрагируемая в водную фазу 1 М NaCl и фенолом pH 6,4 фракция ДНК I содержит 12—14% негидролизуемой РНКазой гибридной РНК, обогащена уникальными последовательностями, составляет около 20% от генома и, по-видимому, соответствует транскрипционно активным участкам ДНК хроматина. Экстрагируемая 0,14 М NaCl и «щелочным» фенолом (pH 8,5) ДНК II составляет около 70% от всей клеточной ДНК, содержание гибридной РНК в ней не превышает 2%. Трудноэкстрагируемая и, по-видимому, связанная с мембранными компонентами, ДНК III не превышает 10% от суммарной ДНК. При индукции транскрипции во всех изученных случаях доля повторяющихся последовательностей примерно на 10% увеличивается в ДНК I и одновременно уменьшается в ДНК III. Это можно рассматривать как результат перераспределения последовательностей между фракциями хроматина, соответствующими мембранной ДНК и транскрипционно активным районам генома. По гибридизации с 3H-рибосомной РНК установлено, что вклад p-генов в наблюдаемые изменения организации последовательностей в изученных фракциях ДНК крайне незначителен.