БИОХИМИЯ, 1981, том 46, вып. 5, с. 920–929
УДК 577.156
Внеклеточная сериновая протеиназа Bacillus thuringiensis
Всесоюзный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов, Москва
Поступила в редакцию 11.07.1980
Аннотация
Чистая внеклеточная сериновая протеиназа выделена из культуральной жидкости В. thuringiensis, штамм 69-6R фракционированием сульфатом аммония, последовательной аффинной хроматографией на сефарозных сорбентах, содержащих в качестве лигандов ковалентно связанные n-(ω-аминометил)-фенилборную кислоту и бациллихин. Фермент полностью инактивируется ингибиторами сериновых протеиназ, имеет мол. в. 29 000, pI 8,4, проявляет максимальную активность и устойчивость при pH 8,5, но быстро инактивируется при pH ниже 4 и выше 10 и температуре выше 60°. Фермент гидролизует азоказеин, бычий сывороточный альбумин и хромогенные пептидные субстраты, например n-нитроанилид бензилоксикарбонил-L-аланил-L-аланил-L-лейцина, обладает высокой эстеролитической активностью. Внеклеточная протеиназа В. thuringiensis представляет собой сериновую протеиназу, которая по физико-химическим свойствам, отношению к ингибиторам и субстратной специфичности подобна субтилизинам, но по аминокислотном составу (Lys16, His4, Arg8, Asx28, Thr16, Ser18, Glx29, Pro12, Gly32, Ala31, Val19, Met5, Ile12, Leu18, Tyr11, Phe10, Trp4) занимает промежуточное положение между субтилизинами и внутриклеточными протеиназами бацилл.