БИОХИМИЯ, 1981, том 46, вып. 5, с. 911–919

УДК 577.154.25

Очистка и свойства β-галактозидазы Alternaria tenuis

© 1981 Е.В. Летунова, А.С. Тихомирова, С.Д. Шиян, В.А. Маркин, А.Я. Хорлин, А.М. Безбородов

Институт биохимииим. А.Н. Баха АН СССР, Москва

Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина АН СССР, Москва

Поступила в редакцию 04.07.1980

Аннотация

β-Галактозидаза Alternaria tentus очищена до гомогенного состояния из фильтрата культуральной жидкости осаждением ацетоном, ионообменной хроматографией на ДЭАЭ-целлюлозе, сорбцией на гидроксилапатите и аффинной хроматографией на N-(β-D-галактопиранозилтиокарбамоил)-ε-аминокапроил-AH-сефарозе 4B. Однородность подтверждена ультрацентрифугированием и электрофорезом в полиакриламидном геле с DS-Na и без него. Удельная активность гомогенного фермента 160 ед. на 1 мг белка;молекулярная масса, определенная различными методами, 142 000—176 000; pI 4,6; температурный оптимум 60—65°; pH-оптимум 3,8—4,4 для o-нитрофенил-β- D-галактопиранозида (o-НФГ) и 3,6—4,8 для лактозы; Km = 0,21·10−3 М (для o-НФГ) и 6,57·10−3 М для лактозы. Фермент является гликопротеином и содержит до 30% углеводов. ЭДТА и n-хлормеркурибензоат не оказывают действия на активность β-галактозидазы. Галактоза является конкурентным ингибитором, глюкоза не оказывает ингибирующего воздействия на фермент.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha