БИОХИМИЯ, 1981, том 46, вып. 5, с. 832–840
УДК 577.153
Обнаружение и характеристика дополнительного центра присоединения субстрата и его аналогов у неорганической пирофосфатазы
Лаборатория молекулярной биологии и биоорганической химии им. А.Н. Белозерского МГУ, Москва
Поступила в редакцию 29.05.1980
Аннотация
Фосфат, пирофосфат, имидодифосфат, ЭДТА и триполифосфат увеличивают константу скорости разрушения промежуточного соединения неорганической пирофосфатазы из дрожжей с субстратом, получаемого при остановке реакции фторидом. Величина эффекта возрастает в приведенном ряду в 19 раз, и его зависимость от концентрации лигандов описывается гиперболической функцией. Рассчитанные значения констант диссоциации комплексов фермент — лиганд находятся в диапазоне 0,16—1 мМ. При высокой концентрации ионов Na+, добавляемых вместе с лигандами, эффект уменьшается. Величина τ½ для присоединения Pi к фермент-субстратному соединению составляет 0,15 мин. Полученные данные свидетельствуют о наличии на пирофосфатазе центра присоединения анионных лигандов, отличного от активного. Судя по тому, что Pi (9,5 мМ) не изменяет скорость ферментативного расщепления PPi этот центр не влияет на гидролитическую функцию пирофосфатазы.