БИОХИМИЯ, 1981, том 46, вып. 4, с. 657–666
УДК 576.8.098
Локализация грамицидина S на цитоплазматической мембране бактерий-продуцента Bacillus brevis и его действие на активность мембранных ферментов
Институт биохимии им. А.Н. Баха АН СССР, Москва
Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 30.04.1980
Аннотация
Показано, что малатдегидрогеназа изолированных мембран продуцента грамицидина S Bacillus brevis var. G.-B. (R-форма) полностью ингибируется этим антибиотиком (~200 мкг/мг белка), сукцинат- и NADH-дегидрогеназы нечувствительны к нему (до концентрации 1 мг на 1 мг белка), а соответствующие оксидазы угнетаются не более чем на 65—75%, вероятно, благодаря частичному повреждению терминальных участков дыхательной цепи. Дыхание интактных клеток продуцентов угнетается экзогенным грамицидином S не более чем на 55—60%, тогда как дыхание чувствительных к антибиотикам клеток Micrococcus lysodeikticus ингибируется полностью. Показано, что основными фосфолипидными компонентами мембран изученного штамма Вас. brevis являются фосфатидилэтаноламин (50%), фосфатидилглицерин (15%) и дифосфатидилглицерин (25%). Предполагается, что резистентность клеток Вас. brevis к экзогенному грамицидину S отчасти обусловлена сбалансированностью отношения заряженных и амфотерных фосфолипидов. С помощью 31P-ЯМР-спектроскопии проследили динамику содержания свободных фосфорных соединений в живых клетках и экстрактах из клеток Вас. brevis по мере развития культуры и синтеза ею грамицидина S. Отмечается стабильность уровня монофосфатов углеводов, низкий уровень нуклеозидди- и трифосфатов, динуклеотидов и его падение за пределы разрешения метода при достижении определенной плотности культуры и содержания грамицидина S (>100 мкг/мл). Приводятся доказательства локализации грамицидина на мембране продуцента и обсуждаются причины появления NADH-дегидрогеназной активности клеток на определенной стадии развития культуры.