БИОХИМИЯ, 1981, том 46, вып. 3, с. 495–503
УДК 577.156
Тропонин сердца быка: выделение и изучение катионсвязывающих свойств с помощью флуоресцентного зонда диметиламинонафтэйродина
Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 25.03.1980
Аннотация
Предложен метод выделения тропонина из сердца быка и осуществлено разделение тропонинового комплекса на компоненты. Флуоресцентный зонд диметиламинонафтэйродин связывается с тропонином сердца, флуоресценция комплекса тропонин — диметиламинонафтэйродин возрастает при увеличении концентрации Ca2+ с pCa 8 до pCa 5. Кажущаяся константа связывания Ca2+ тропонином сердца, определенная из изменений флуоресценции комплекса тропонин — диметиламинонафтэйродин, составляет 2,1··106 М-1. Измеренная с помощью диметиламинонафтэйродина кажущаяся константа связывания Sr2+ тропонином сердца составляет 5·105 М-1. Ионы магния не влияют на параметры связывания Са2+ и Sr2+. Полученные результаты свидетельствуют о наличии в структуре тропонина сердца Ca-специфических участков, связывание Са2+ по которым вызывает конформационные изменения структуры тропонина сердца, регистрируемые с помощью диметиламинонафтэйродина. Коэффициент Хилла для индуцируемых Ca2+ и Sr2+ и регистрируемых с помощью диметиламинонафтэйродина конформационных изменений тропонина сердца равен единице. Применение диметиламинонафтэйродина в качестве маркера конформационных изменений позволяет сравнить катионсвязывающие свойства тропонина сердца и тропонина скелетных мышц.