БИОХИМИЯ, 1981, том 46, вып. 2, с. 376–381
УДК 577.15.062:577.158.422:576:851:48
Кинетическое изучение фумарат-гидратазной реакции, катализируемой свободными клетками Escherichia coli
Химический факультет Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 16.05.1980
Аннотация
Проведено кинетическое изучение фумарат-гидратазной (фумаразной) реакции, катализируемой клетками Е. coli штамм 85 при высоких концентрациях субстрата — фумарата калия. Разработан автоматизированный метод определения продукта изучаемой реакции — яблочной кислоты с использованием коммерческого препарата малатдегидрогеназы из сердца свиньи. Для выяснения кинетического механизма реакции исследована фумаразная активность клеток бактерий при различных концентрациях субстрата и различных значениях pH при использовании в качестве источника фермента целых и разрушенных клеток Е. coli 85. Показано, что скорость фумаразной реакции в клетках Е. coli зависит от диффузионных и транспортных процессов переноса реагентов через клеточную стенку и цитоплазматическую мембрану клеток микроорганизма. Определен оптимум pH изучаемой реакции у свободных клеток Е. coli, равный 8—9, и скорость процесса синтеза яблочной кислоты из фумарата калия в оптимальных условиях, которая изменяется в пределах (6—13)·10-5 ммоль/с на 1 мг белка в зависимости от партии клеток.