БИОХИМИЯ, 1981, том 46, вып. 2, с. 369–375
УДК 577.156
Модификация двух остатков тирозина в аспергиллопепсине A хлоридом n-нитрофенилдиазония
Химический факультет Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 08.05.1980
Аннотация
Установлено, что хлорид n-нитрофенилдиазония модифицирует в аспергиллопепсине A остатки Tyr-75 и Tyr-189 в равной степени. При pH 5,2 и 45-кратном избытке реагента в белок включается ~1,8 остатка ингибитора, что вызывает снижение протеолитической активности по расщеплению гемоглобина на 75%. Специфический ингибитор карбоксильных протеиназ — пепстатин — защищает от модификации один из остатков тирозина. Хроматографией на сефароза-4B-бацитрацине показано, что модифицированный при pH 5,2 аспергиллопепсин A состоит из смеси белков с включением одного и двух остатков n-нитрофенилдиазония. Белок, содержащий один остаток ингибитора, сохраняет ~35% активности нативного белка, а белок, содержащий два остатка ингибитора, практически не активен. Сделан вывод, что по крайней мере один из модифицируемых остатков тирозина существенно важен для функционирования фермента.