БИОХИМИЯ, 1980, том 45, вып. 9, с. 1603–1608
УДК 577.155.2
ДНК-полимераза из эмбрионов морского ежа Strongylocentrotus intermedius. Очистка и некоторые свойства
Тихоокеанский институт биоорганической химии ДВНЦ АН СССР, Владивосток
Поступила в редакцию 11.11.1979
Аннотация
В гомогенате эмбрионов морского ежа S. intermedius на стадии 32 бластомера обнаружено с помощью хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе три пика ДНК-полимеразной активности. Фракционированием сульфатом аммония, хроматографией на ДЭАЭ-целлюлозе, оксиапатите, ДНК-целлюлозе выделена и очищена более чем в 2750 раз ДНК-полимераза, составляющая основную долю ДНК-синтезирующей активности клеток эмбрионов морского ежа. Для проявления ферментативной активности необходимо присутствие двухцепочечной ДНК, активированной панкреатической ДНКазой, четырех дНТФ, ионов Mg2+ или Mn2+. Фермент ингибируется высокой ионной силой (150 мМ KCl или NaCl) и сульфгидрильным реагентом N-этилмалеимидом. Оптимум pH равен 8,0. Молекулярный вес, определенный гель-фильтрацией, составляет ~150000. Предполагается, что выделенная ДНК-полимераза относится к типу ДНК-полимераз α.