БИОХИМИЯ, 1980, том 45, вып. 9, с. 1582–1588
УДК 577.158.54 : 535.379
Иммобилизованная люцифераза светляков из Luciola mingrelica. Изменение pH-зависимости каталитической активности и стабильности фермента при иммобилизации на различных полисахаридных носителях
Кафедра химической энзимологии Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 29.10.1979
Аннотация
Проведена иммобилизация люциферазы светляков на различных полисахаридных носителях: сефарозе, ультродексе, целлофане, ультрогеле, активированных бромцианом. Измерены каталитическая активность и константы скорости инактивации растворимого и иммобилизованного фермента при 25° в интервале pH 6,0—9,0. Показано, что при иммобилизации на сефарозе pH-профиль активности сдвигается в область более низких значений pH, а при иммобилизации на ультрогеле и ультродексе — значительно расширяется. Показано, что при иммобилизации на ультрогеле и ультродексе наблюдается стабилизация фермента в 3—100 раз при pH<7,5, а люцифераза, иммобилизованная на сефарозе и целлофане, во всем изученном интервале pH в 10—1000 раз стабильнее растворимого фермента. Показано, что процесс инактивации люциферазы, иммобилизованной на сефарозе и целлофане, лимитируется окислением SH-групп фермента и существенно замедляется при добавлении дитиотреитола. Инактивация люциферазы, иммобилизованной на ультрогеле и ультродексе, не лимитируется окислением SH-групп, как и в случае растворимого фермента.