БИОХИМИЯ, 1980, том 45, вып. 8, с. 1371–1378
УДК 577.158
Очистка и свойства дегидрогеназ глюкозо-6-фосфата и 6-фосфоглюконата из Pseudomonas oleovorans
Институт биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, Пущино
Поступила в редакцию 15.10.1979
Аннотация
Из клеток факультативного метилотрофа Ps. oleovorans выделены дегидрогеназы глюкозо-6-фосфата и 6-фосфоглюконата — ферменты диссимиляционного гексулозофосфатного цикла. Метод очистки включал фракционирование белков (NH4)2SO4, гель-фильтрацию через сефакрил S-200 и хроматографию на ДЭАЭ-биогеле А и фосфоцеллюлозе. Ферменты очищены приблизительно в 400 раз. Полученный препарат глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы давал одну полосу при аналитическом диск-электрофорезе в полиакриламидном геле; 6-фосфоглюконатдегидрогеназа имеет небольшую примесь. Молекулярный вес дегидрогеназ—100 000 и 110 000 соответственно. Оба фермента имеют по 2 субъединицы. Величины Km глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы — 65 мкМ для глюкозо-6-фосфата и 28 мкМ для NADP. Величины Km 6-фосфоглюконатдегидрогеназы—152 мкМ для 6-фосфоглюконата и 55 мкМ для NADP. Активные ингибиторы глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы — нуклеотиды. Дегидрогеназа 6-фосфоглюконата ингибируется рибозо-5-фосфатом и фруктозо-1,6-дифосфатом.