БИОХИМИЯ, 1980, том 45, вып. 7, с. 1319–1328
УДК 577.156
О субстратной специфичности внутриклеточной сериновой протеиназы Bacillus subtilis. Протеолиз B-цепи инсулина и рибонуклеазы A и кинетика гидролиза n-нитроанилидных субстратов
Всесоюзный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов, Москва
Химический факультет Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 01.11.1979
Аннотация
Изучена субстратная специфичность внутриклеточной сериновой протеиназы (ВСП-103), выделенной из штамма Bacillus subtilis 103. Как и субтилизины, протеиназа гидролизует нативную панкреатическую рибонуклеазу A по связи Ala20-Ser21, превращая ее тем самым в рибонуклеазу S, инактивирующуюся трипсином и состоящую из нековалентно связанных 20-членного S-пептида и S-белка (104 аминокислотных остатка). Протеиназа гидролизует единственную связь Leu15-Tyr16 B-цепи окисленного бычьего инсулина, тогда как субтилизины в аналогичных условиях гидролизуют еще четыре пептидные связи. Определены кинетические константы гидролиза ряда n-нитроанилидов N-замещенных ди- и трипептидов. Внутриклеточная сериновая протеиназа предпочитает лейцин в положении P1 фенилаланину и проявляет большую зависимость активности от наличия гидрофобных аминокислот в положениях P2 и P3 по сравнению с секреторными субтилизинами. Все это указывает на то, что субстратная специфичность фермента лежит в рамках специфичности секреторных субтилизинов, но более узка.