БИОХИМИЯ, 1980, том 45, вып. 7, с. 1215–1221
УДК 547.963.32
О существовании формы Т-антигена вируса SV40, не способной взаимодействовать с ДНК
Онкологический научный центр АМН СССР, Москва
Поступила в редакцию 02.08.1979
Аннотация
Метод задержки комплекса ДНК-белок на нитроцеллюлозных фильтрах был использован для изучения взаимодействия SV40 Т-антигена с вирусной ДНК. Очистка Т-антигена включала ионообменную хроматографию на ДЭАЭ-целлюлозе, преимущественную адсорбцию клеточных белков на однонитчатой ДНК-целюллозе, хроматографию на гепарин-сефарозе и удаление клеточных белков иммуносорбентом. Только последний этап позволил освободиться от примеси клеточных ДНК-связывающихся белков, что подтверждено реакцией нейтрализации Т-антигена специфическими антителами. Показано, что Т-антиген и клеточные ДНК-связывающиеся белки взаимодействуют с SV40 ДНК при разных значениях pH: 6,0—6,4 и 7,9 соответственно. Полученный Т-антиген был пропущен через колонку с нативной ДНК-целлюлозой при оптимальных для взаимодействия с ДНК значениях pH и ионной силы. При этом значительное количество Т-антигена (30—40%) не связывалось с нативной тимусной ДНК и не взаимодействовало с SV40 ДНК. Предполагается, что эта фракция представляет собой форму Т-антигена, претерпевшего структурные или функциональные изменения в процессе предшествовавшего специфического взаимодействия с вирусной или клеточной ДНК.