БИОХИМИЯ, 1980, том 45, вып. 6, с. 1086–1092
УДК 577.153.35
Влияние последовательной химической модификации на активность и термостабильность растворимой и иммобилизованной глюкоамилазы
Химический факультет Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 21.09.1979
Аннотация
Изучение химической модификации глюкоамилазы из Aspergillus niger с помощью акрилоилхлорида показало, что первые две трети от общего количества доступных аминогрупп фермента достаточно легко вступают в химическую реакцию, и полученная растворимая акрилоилглюкоамилаза характеризуется лишь незначительным уменьшением активности и термостабильности. Дальнейшая модификация аминогрупп более затруднительна и сопряжена с существенной потерей активности (в 6 раз при 92% модификации) и термостабильности (в 3,5 раза при той же степени модификации) глюкоамилазы. Многоточечная иммобилизация глюкоамилазы за счет вшивания ее акрилоилпроизводного в полиакриламидный гель приводит к дестабилизации фермента. При этом с увеличением точек присоединения фермента к матрице термостабильность его падает по сравнению с нативной глюкоамилазой, хотя и несколько возрастает (до 1,5 раза) по сравнению с растворимой акрилоилглюкоамилазой. Показано, что эффект дестабилизации глюкоамилазы за счет химической модификации превышает незначительный эффект стабилизации фермента за счет многоточечного связывания его с полимерной матрицей.