БИОХИМИЯ, 1980, том 45, вып. 5, с. 794–801
УДК 577.154
Кинетика и механизм инактивации и реактивации иммобилизованной люциферазы светляков Luciola mingrelica и роль сульфгидрильных групп в этих процессах
Химический факультет Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 11.05.1979
Аннотация
Исследована роль сульфгидрильных групп фермента в катализе и процессе инактивации растворимой и иммобилизованной на сефарозе 4B люциферазы светляков Luciola mingrelica. Установлена существенная роль SH-групп в растворимой и иммобилизованной люциферазе путем титрования фермента 5,5′-дитиобис-2-нитробензойной кислотой. Показано, что для иммобилизованной люциферазы светляков скорость процесса инактивации лимитируется окислением SH-групп фермента, поэтому дитиотреитол эффективно защищает фермент от инактивации. Исследована кинетика процессов инактивации и реактивации иммобилизованной люциферазы в присутствии дитиотреитола. Дитиотреитол не оказывает защитного влияния на растворимую люциферазу, что указывает на другую лимитирующую стадию процесса инактивации люциферазы в растворимом состоянии. Предложен механизм инактивации люциферазы светляков, выведена кинетическая схема этих процессов и определены константы скоростей отдельных стадий инактивации люциферазы, иммобилизованной на сефарозе 4B.