БИОХИМИЯ, 1980, том 45, вып. 4, с. 661–668
УДК 577.157
Автофосфорилирование сАМР-зависимой протеинкиназы из мозга свиньи
Институт молекулярной биологии АН СССР, Москва
Поступила в редакцию 15.06.1979
Аннотация
Обнаружен эффект автофосфорилирования сАМР-зависимой протеинкиназы из мозга свиньи, заключающийся в переносе приблизительно 1,5 молекулы фосфата с [γ-32Р]АТР на димер регуляторной субъединицы. Реакция автофосфорилирования требует обязательного присутствия ионов Mg2+ и протекает быстро во времени: более 50% 32P включается уже в 1-ю мин инкубации при 30°. pH-зависимость реакции автофосфорилирования отличается от таковой для фосфотрансферазной реакции с гистоном H1 в качестве субстрата. Фосфоформа холофермента обладает большей чувствительностью к сАМР, чем дефосфоформа, однако при насыщении циклическим нуклеотидом обе формы связывают 2 моль сАМР на 1 моль холофермента. Рассчитаны константы активации и диссоциации для обеих форм холофермента. Показано, что реакция автофосфорилирования протекает по внутримолекулярному механизму: фосфорилирование регуляторной субъединицы может протекать только в составе холофермента. При увеличении концентрации сАМР в инкубационной среде скорость автофосфорилирования падает. Обсуждается регулирующее действие автофосфорилирования на сАМР-зависимые протеинкиназы второго типа.