БИОХИМИЯ, 1980, том 45, вып. 1, с. 42–47
УДК 577.158
Аффинная хроматография менадионредуктазы
Экспериментальный отдел Белорусского научно-исследовательского института неврологии, нейрохирургии и физиотерапии, Минск
Поступила в редакцию 05.03.1979
Аннотация
Описано получение аффинных сорбентов менадионредуктазы (NAD(P)Н : акцептор — оксидоредуктаза, КФ 1.6.99.2) на основе CNBr-активированной сефарозы 4В и активированной СН-сефарозы 4В. Сорбенты представляют собой сефарозы, модифицированные 4-анилино-5-метокси-1,2-бензохиноном *, где последний выступает в качестве аффинного лиганда. Связанная с сорбентами менадионредуктаза специфически элюируется NAD(P)H, в то время как NAD(P) не вызывает десорбции фермента. Выход фермента составляет 83—95% при 102-кратной очистке его. При исследовании методом диск-электрофореза в полиакриламидном геле обнаружена одна фракция, идентифицированная как менадионредуктаза, и другая — примесная. Предполагается, что в основе биоспецифического связывания менадионредуктазы с сорбентами лежит образование комплекса окисленного фермента с хиноном, который распадается в присутствии NAD(P)H, что в свою очередь приводит к десорбции менадионредуктазы.
Текст статьи
Сноски
* Принятые сокращения: АМОБХ — 4-анилино-5-метокси-1,2-бензохинон; ДМОБХ — 4,5-диметокси-1,2-бензохинон; ДХФИФ — 2,6-дихлорфенолиндофенол.