БИОХИМИЯ, 1980, том 45, вып. 1, с. 20–27
УДК 577.154.34
Очистка и свойства левансахаразы Gluconobacter oxydans Л-1
Ленинградский государственный университет им. А.А. Жданова
Поступила в редакцию 26.12.1978
Аннотация
Из культуральной жидкости Gluconobacter oxydans Л-1 выделена левансахараза, катализирующая синтез полисахарида левана из фруктозильных остатков сахарозы, и очищена до гомогенного состояния хроматографией на гидроксиапатите и гель-фильтрацией через сефадекс G-100. По данным электрофореза молекулярный вес левансахаразы равен 58 000. В состав молекулы фермента входит 25,86% кислых аминокислот, 13,74% основных аминокислот и 12,77% ароматических аминокислот, из серосодержащих аминокислот обнаружена одна молекула метионина. Ультрафиолетовый спектр поглощения очищенной левансахаразы имеет максимум при 280 нм и минимум при 254 нм. Путем измерения начальных скоростей реакций, катализируемых левансахаразой G. oxydans Л-1 в присутствии 14C-меченой сахарозы установлено, что этот фермент осуществляет реакцию гидролиза сахарозы, реакцию синтеза левана и реакцию обмена меченой глюкозной половины сахарозы со свободной глюкозой. Определены начальные скорости освобождения глюкозы и фруктозы во время реакций трансфруктозилирования. Показано, что добавление в реакционную смесь низкомолекулярного левана в качестве предшественника синтеза полисахарида приводит к увеличению начальной скорости освобождения меченой фруктозы в 2 раза, а выхода левана с 41 до 69%.